Mispairing PCR: differenze tra le versioni

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{{C|voce confusa, un esperto dovrebbe rendere la forma più fruibile anche a un non chimico||maggio 2006}}

{{S|biotecnologie}}

La '''mispairing PCR''' ([[reazione a catena della polimerasi]] disaccoppiante) consente,è insiemeun adprocedimento altreper applicazioni,la di creare sitireplicazione di restrizioneparti per particolaridel [[enzima|enzimiDNA]], laddoveche nonconsente fosserola presentirilevazione naturalmente,della con l’usopresenza di [[primer|primers]] contenenti una o piùdeterminati [[Paio di basi|basigeni]] non complementari (mispair) alla reale sequenza da amplificare.

In dettaglio consente, insieme ad altre applicazioni, di creare siti di restrizione per particolari [[enzima|enzimi]], laddove non fossero presenti naturalmente, con l'uso di [[primer]]s ([[oligonucleotidi]]) contenenti una o più [[Paio di basi|basi]] non [[Complementarietà|complementari]] (mispair) alla reale sequenza da amplificare.

La condizione necessaria per l’appaiamento fra primer e [[templato]] è che, oltre alla serie di basi in 5’ a monte delle basi che non si appaiano, almeno le ultime 2 basi al 3’ del primer siano complementari al templato. Questa tecnica può essere sfruttata per individuare mutazioni o varianti alleliche di un [[gene]], infatti, disegnando ''mispairing primers'' la cui estremità 3’ si appai appena a monte della base da verificare è possibile creare un sito di restrizione solo nel caso in cui sia presente una determinata vatiante allelica.

La condizione necessaria per l’appaiamentol'appaiamento fra il primer e il frammento di [[templatoDNA]] che si vuole replicare è che, oltre alla serie di basi inall'estremità 5’5' a monte delle basi che non si appaiano, almeno le ultime 2 basi alall'estremità 3’3' del primer siano complementari alalla sequenza genica che si vuole templatoreplicare. Questa tecnica può essere sfruttata per individuare mutazioni o varianti alleliche di un [[gene]], infatti, disegnando ''mispairing primers'' la cui estremità 3’3' si appai appena a monte della base da verificare è possibile creare un sito di restrizione solo nel caso in cui sia presente una determinata vatiantevariante [[allele|allelica]], permettendo di rilevare la [[mutazione]] nel materiale genetico sottoposto a test.

[[categoria:PCR]]

Questo procedimento permette di trovare le marcature genetiche di determinate [[Malattia genetica|malattie]] in individui ancora sani, permettendo una terapia precoce.

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== Voci correlate ==

*[[Polimerasi]]

*[[Reazione a catena della polimerasi]]

{{portale|biologia}}

[[categoriaCategoria:PCR]]