Mispairing PCR: differenze tra le versioni

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{{wS|biotecnologie}}

La '''mispairing PCR''' ([[reazione a catena della polimerasi]] disaccoppiante) è un procedimento per la replicazione di parti del [[DNA]] che consente la rilevazione della presenza di determinati [[geni]].

== Mispairing PCR ==

LaIn '''mispairing PCR'''dettaglio consente, insieme ad altre applicazioni, di creare siti di restrizione per particolari [[enzima|enzimi]], laddove non fossero presenti naturalmente, con l’usol'uso di primers[[primer]]s ([[oligonucleotidi]]) contenenti una o duepiù [[Paio di basi|basi]] non [[Complementarietà|complementari]] (mispair) alla reale sequenza da amplificare. La condizione necessaria per l’appaiamento fra primer e stampo è che, oltre alla serie di basi in 5’ a monte delle basi che non si appaiano, almeno le ultime 2 delle basi in 3’ del primer siano complementari allo stampo. Ciò può essere sfruttato per individuare delle mutazioni disegnando ''mispairing primers'' la cui estremità in 3’ si appai appena a monte della base da verificare, e che creino un sito di restrizione solo nel caso in cui, nella posizione da verificare, sia presente la base mutata o alternativamente quella wild type

La condizione necessaria per l'appaiamento fra il primer e il frammento di [[DNA]] che si vuole replicare è che, oltre alla serie di basi all'estremità 5' a monte delle basi che non si appaiano, almeno le ultime 2 basi all'estremità 3' del primer siano complementari alla sequenza genica che si vuole replicare. Questa tecnica può essere sfruttata per individuare mutazioni o varianti alleliche di un [[gene]], infatti, disegnando ''mispairing primers'' la cui estremità 3' si appai appena a monte della base da verificare è possibile creare un sito di restrizione solo nel caso in cui sia presente una determinata variante [[allele|allelica]], permettendo di rilevare la [[mutazione]] nel materiale genetico sottoposto a test.

Questo procedimento permette di trovare le marcature genetiche di determinate [[Malattia genetica|malattie]] in individui ancora sani, permettendo una terapia precoce.

== Voci correlate ==

*[[Polimerasi]]

*[[Reazione a catena della polimerasi]]

{{portale|biologia}}

[[Categoria:PCR]]