Real time PCR: differenze tra le versioni

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{{nota disambigua|la reazionePCR inversa in sigla RT-PCR|Reazione a catena della polimerasi inversa|[[Reverse transcriptase-polymerase chain reaction]]}}

{{F|biochimica|luglio 2016}}

La '''PCR quantitativa''' (in inglese '''''real time PCR''''' o '''''quantitative PCR''''', abbreviato '''qPCR''') è un metodo che simultaneamente amplifica ([[reazione a catena della polimerasi]] o PCR) e quantifica il [[DNA]], simile ma da non confondere col metodo RT-PCR ([[Reverse transcriptase-polymerase chain reaction|Reverse transcriptase-PCR]]).<ref>{{Treccani|pcr-quantitativa_%28Enciclopedia-della-Scienza-e-della-Tecnica%29/|PCR quantitativa}}</ref>

Il DNA è amplificato da reazioni a catena della [[DNA-polimerasi]]. Dopo ogni turno di amplificazione, il DNA è quantificato. I metodi comuni di quantificazione includono l'uso delle colorazioni [[fluorescenza|fluorescenti]] che [[intercalanti|intercalano]] con il DNA doppio-filamento (ds) e gli [[oligonucleotide|oligonucleotidi]] modificati del DNA (denominati sonde) che sono fluorescenti una volta ibridati con un DNA. Spesso la PCR real-time è combinata con la [[ReverseReazione transcriptase-polymerasea chaincatena reactiondella polimerasi inversa|PCR Retro Trascrizionale]] (RT-PCR) per quantificare i livelli di espressione di specifici RNA: la retro-trascrizione (o trascrizione inversa) produce del DNA complementare a singolo filamento detto [[cDNA]] (complementary DNA) mantenendo inalterati i rapporti relativi di concentrazione delle diverse specie degli RNA. In questo modo è possibile, ad esempio, misurare l'espressione relativa di un gene ad un tempo particolare, o in una cellula o in un tipo particolare di tessuto. La combinazione di queste due tecniche è spesso denominata RT-PCR quantitativa.

== Saggio quantitativo con la PCR real-time ==