ELISA (biochimica): differenze tra le versioni

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'''ELISA''', [[acronimo]] dell'espressione [[lingua inglese|inglese]] '''''Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay''''' ('''Saggio Immuno-Assorbente legato ad un Enzima'''), è un versatile metodo di [[analisi immunologica]] usato in [[biochimica]] per rilevare la presenza di un dato [[antigene]], tipicamente appartenente a un [[microrganismo]] [[microrganismo patogeno|patogeno]], grazie all'uso di uno specifico [[anticorpo]].

[[Image:PSA-sandwich_3QUM.png|thumb|300px|'''Struttura cristallografica che esemplifica un saggio sandwich ''ELISA'' per quantificare la concentrazione [[semenogelasi|PSA o antigene della prostata]]'''<ref name="Stura-22037582">{{cite journal | author = Stura, E.A., Muller, B.H., Michel, S., Jolivet-Reynaud, C., Ducancel, F. | title = Crystal structure of human prostate-specific antigen (PSA) in a sandwich antibody complex. | journal = J. Mol. Biol. | date = 9 December 2011 | url = http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022283611011314 | pmid = 22037582 | doi = 10.1016/j.jmb.2011.10.007 | volume = 414 | pages = 530-544 | issue = 5 }}</ref>. (1) L'anticorpo di cattura sotto forma di frammento Fab 5D3D11 (celeste/verde) corriponderebbe all'anticorpo assorbito sulla placca. (2) Nella seconda fase l'antigene (marrone) viene catturato e (3) rilevato da un secondo anticorpo 5A5D5 che in un vero test sarebbe legato ad un enzima.]]

ELISA trova ampio uso anche per misurare la concentrazione di [[anticorpo|anticorpi]] nel [[plasma (biologia)|plasma sanguigno]], come ad esempio nei [[Test HIV|test per l'HIV]].

'''ELISA''' è un [[acronimo]] che è derivata dall'espressione in [[lingua inglese|inglese]] '''''Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay''''' ('''Saggio Immuno-Assorbente legato ad un Enzima'''). Si tratta di versatile metodo d'analisi immunologica usato in [[biochimica]] per rilevare la presenza di una sostanza usando uno o più [[anticorpi]] ad uno dei quali é legato un [[enzima]]. La sostanza da rilevare puo essere un [[antigene]] appartenente ad un [[patogeno]] od una [[molecola]] più piccola, chiamata [[aptene]], come per esempio per riconoscere la presenza di [[steroidi]]. Se invece di un enzima, un radionucleide (spesso l'[[Radiochimica|iodio-125]]) viene usato per rilevare la positività del test, si parla di [[Dosaggio radioimmunologico|RIA]] dall'inglese (radio-immuno assay).

Ci sono due varianti del test ELISA: una è chiamata ELISA COMPETITIVO e l'altro ELISA NON COMPETITIVO.

Il saggio ELISA trova anche ampio uso per accertare la presenza di [[anticorpi]] contro un determinato antigeno nel [[plasma (biologia)|plasma sanguigno]] del paziente per accertarsi se c'è stata una esposizione ad un determinato patogeno. Questo avviene nel [[Test HIV|test per l'HIV]] per accertarsi se il sistema immunitario del soggetto si è trovato a confronatre il virus dell'[[AIDS]].

Esistono inoltre due metodiche di ELISA NON COMPETITIVO: il metodo diretto (o DAS-ELISA o sandwich elisa), e il metodo indiretto.

Ci sono diversi varianti del test ELISA. Che si differenziano secondo il componente che si vuole rilevare. Nel test diretto viene determinata la presenza dell'antigene, in quello indiretto, la presenza di anticorpi contro l'antigene. Il saggio puo essere competitivo (ELISA COMPETITIVO) o no (ELISA NON COMPETITIVO).

L'ELISA NON COMPETITIVO diretto si effetua secondo diverse metodiche: semplice e sandwich ELISA.

Nel metodo semplice l'antigeno è assorbito sulla placca e rilevato con un anticorpo marcato da un enzima. Nel medodo a sandwich l'anticorpo che è usato per catturare l'antigene é assorbito sulla placca, gli anticorpi assorbiti sono in sequito esposti al fluido che potrebbe contenere l'antigene ed un secondo anticorpo, marcato viene aggiunto per rilevare che l'antigeno è stato catturato. In questo secondo caso, gli epitopi sull'antigeno dei due anticorpi devono essere completamante distinti senza alcuna sovraposizione.

Il metodo diretto serve a determinare la presenza di un antigene voluto, mentre l'indiretto la presenza di un anticorpo voluto.

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* non si deve effettuare la distribuzione dei campioni, dei coniugati e del cromogeno nei pozzetti di micropiastra o in microstrip; i lavaggi sono estremamente semplificati;

* la tecnologia innovativa consente la realizzazione di kit da laboratorio pronti all'uso e di kit portatili per analisi in campo (ambulatori, aeroporti, dogane, allevamenti).

== Note ==

<references/>

== Voci correlate ==